• Primrose, Twiman e Bold Ingegneria Genetica - Principi e Tecniche. Zanichelli editore
• Brown Biotecnologie molecolari- Principi e tecniche Zanichelli editore
• Mengoni, Scialpi La PCR e le sue varianti. FUP
Obiettivi Formativi
Conoscenze:
Basi concettuali e tecniche nell'ambito delle tecniche del DNA ricombinante e possibilità di applicazione nelle aree della ricerca di base ed applicata
Competenze acquisite:
Saper progettare esperimenti di manipolazione e di studio del DNA per scopi di ricerca di base ed applicata
Capacità acquisite al termine del corso:
Identificare e scegliere la tecnica più opportuna in diverse situazioni/casi studio
Prerequisiti
Conoscenze di base di genetica, biologia molecolare e biochimica
Metodi Didattici
Lezioni frontali
Modalità di verifica apprendimento
Test scritto
Programma del corso
Gli strumenti di base
Gli strumenti e le tecniche: enzimi di restrizione e modificazione.
La PCR e le sue varianti
Sequenziamento del DNA. Metodo Sanger e metodi NGS (cenni)
Ibridazione del DNA
Vettori genici. Geni reporter (GFP, lux, lacZ)
Library geniche/genomiche e screening
I sistemi TA, Gateway e pJET
Produzione di proteine eterologhe
I metodi di indagine
Metodi di studio dell’espressione genica (cDNA, microarrays, RNA-Seq)
Metodi di studio della metilazione del DNA (bisolfito, isoschizomeri)
Metodi di studio dell’interazione proteine-DNA (ChIP, EMSA, DNase protection)
Metodi di studio del polimorfismo genico (PCR-based, SSR, SNP, microarrays, sequenziamento, RAD)
La manipolazione del genoma
Manipolazione genica di organismi. Tecniche per OGM.
Mutagenesi diretta e alterazione dell’espressione (RNAi). CRISPR
Biologia sintetica