Citogenetica classica e molecolare. Modalita’ di trasmissione ereditaria nell’uomo. Mutazioni e metodi per la loro identificazione. Epigenetica. Genetica di popolazioni: frequenze alleliche ed evoluzione delle popolazioni.
Neri e Genuardi, Genetica Umana e Medica III edizione, Edra-Masson, 2013
Obiettivi Formativi
Conoscenza e capacità di comprensione
Conoscere le basi della citogenetica, le principali anomalie cromosomiche e i campi di applicazione delle indagini citogenetiche.
Conoscere le basi della genetica molecolare per la ricerca e caratterizzazione di mutazioni puntiformi e riarrangiamenti genici.
Conoscere le basi della genetica di popolazione.
Prerequisiti
Conoscenze di base di genetica.
Metodi Didattici
Lezioni frontali
Modalità di verifica apprendimento
Verifiche scritte in itinere. Esame finale scritto o orale.
Programma del corso
Il cariotipo umano normale
• Criteri di classificazione e nomenclatura
• Eteromorfismi cromosomici
• Cariotipo da sangue periferico
Tecniche di bandeggio
• bande GTG, QFQ, RHG, CBG, NOR
La patologia cromosomica
Anomalie di numero
• meccanismi di formazione di aneuploidie e poliploidie
• principali sindromi autosomiche e gonosomiche
• disomia uniparentale e imprinting genomico
Anomalie di struttura
• duplicazioni/delezioni, cromosomi ad anello, inversioni, isocromosomi, traslocazioni reciproche e robertsoniane
• meccanismi di formazione: dupliconi, ricombinazione omologa non allelica
• principali sindromi associate a duplicazioni/delezioni, isocromosomi, traslocazioni robertsoniane
Citogenetica molecolare
• FISH (Fluorescence In Situ Hybridization)
• con sonde alfoidi, painting, cosmidiche, BAC e PAC per la caratterizzazione dei riarrangiamenti cromosomici
• con sonde locus specifiche per i principali riarrangiamenti cromosomici ematologici
• con sonde locus specifiche per lo studio delle sindromi da microdelezione
• Array-CGH (Comparative Genomic Hybridization), per lo studio delle microdelezioni e delle microduplicazioni cromosomiche sia costituzionali sia acquisite
Modalita’ di trasmissione ereditaria:
• Autosomica: dominante e recessiva
• Legata al cromosoma X: dominante e recessiva
• Mitocondriale
• Poligenica/multifattoriale
Metodi per la ricerca di mutazioni note:
• Analisi di restrizione, ASO, ARMS
Metodi per la ricerca di mutazioni sconosciute:
• DGGE, SSCP, PTT, DHPLC, HRMA
• Sequenziamento diretto del DNA
• Cenni su pirosequenziamento e sequenziamento di nuova generazione
Metodi per la ricerca di riarrangiamenti genici:
• Multiplex PCR
• PCR quantitativa
• MLPA