Struttura degli anticorpi. Geni delle immunoglobuline e diversità anticorpale.
Anticorpi terapeutici. Anticorpi chimerici. Anticorpi umanizzati.
Librerie fagiche. Selezione dei fagi.
Selezione e purificazione degli ScFv
Obiettivi Formativi
Conoscenza delle applicazioni di anticorpi ricombinanti e produzione in batteri.
Prerequisiti
Immunologia, Biologia molecolare
Metodi Didattici
lezione
Modalità di verifica apprendimento
prova scritta
Programma del corso
Definizioni di Anticorpo, Antigene , Immunogeno, Caratteristiche degli Anticorpi per scopi terapeutici. Struttura delle Immunoglobuline e livelli di organizzazione strutturale, domini. Relazione fra domini di struttura e funzione delle Immunoglobuline. Modellazione strutturale delle Immunoglobuline
Diversità delle Immunoglobuline. Organizzazione dei geni, ricombinazione in vivo e possibili applicazioni in vitro dei geni per le porzioni variabili e costanti. Caratteristiche del sito di legame per l’Antigene e definizione degli epitopi
Ruolo dei domini variabili VH e VL nel legame e identificazione della CDR
Impiego terapeutico degli Anticorpi: esempi di anticorpi in commercio e loro caratteristiche strutturali. Anticorpi “umanizzati”. Tecniche di umanizzazione degli anticorpi ed esempi di anticorpi umanizzati in commercio
Produzione di scFV (anticorpi a singola catena del frammenti variabil) Introduzione al “phage display” e sue possibili applicazioni in biotecnologie. Costruzione di una “library fagica” per la produzione di scFv umani. Tecniche di selezione dei fagi e produzione di scFv solubili. Esempi
di scFv ed applicazioni