B020681 - GENETICA MEDICA

Italiano

- Il cariotipo umano normale e patologico
- Colture cellulari e tecniche di preparazione dei cromosomi metafasici
- Citogenetica molecolare (FISH, array-CGH)
- Diagnosi preimpianto
- Diagnosi prenatale invasiva e non invasiva
- Modalita' di trasmissione ereditaria
- Mutazioni puntiformi e riarrangiamenti genici
- Metodi per la ricerca di mutazioni puntiformi e riarrangiamenti genici.
- Test genetici

Neri e Genuardi, Genetica Umana e Medica III edizione, Edra-Masson, 2013

Conoscenza e capacità di comprensione
Conoscere le tecniche di base che vengono utilizzate in un laboratorio di citogenetica per la ricerca e la caratterizzazione di anomalie numeriche e strutturali, costituzionali o acquisite.
Conoscere le principali anomalie cromosomiche riscontrabili nel ciclo di vita.
Conoscere i campi di applicazione delle indagini citogenetiche.
Conoscere le tecniche di base che vengono utilizzate in un laboratorio di genetica medica per la ricerca e caratterizzazione di mutazioni puntiformi e riarrangiamenti genici.

Capacità di applicare conoscenza e comprensione
Conoscere le indicazioni e valutare l'appropriatezza degli esami di citogenetica classica e molecolare nel contesto della diagnosi prenatale con approcci invasivi e non-invasivi, per sospetto di patologia cromosomica nel ciclo di vita, nell'ambito delle tecnologie per la riproduzione assistita.
Conoscere le indicazioni e valutare l'appropriatezza degli esami per la ricerca di mutazioni puntiformi e riarrangiamenti genici.

Lezioni frontali

Lo studente alla fine del corso deve aver acquisito le basi fondamentali della citogenetica classica e molecolare, costituzionale e acquisita.
Lo studente alla fine del corso deve aver acquisito le basi fondamentali della genetica molecolare, costituzionale e acquisita

Verifica scritta o orale.

Il cariotipo umano normale
• Criteri di classificazione e nomenclatura
• Eteromorfismi cromosomici
• Siti fragili
Citogenetica costituzionale prenatale
• Cariotipo da villi coriali e da amniociti
Citogenetica post-natale costituzionale ed acquisita
• Cariotipo da sangue periferico
• Cariotipo da aspirato midollare
• Cariotipo da biopsie tessutali
Tecniche di bandeggio
• bande GTG, QFQ, RHG, CBG, NOR
Citogenetica molecolare
• FISH (Fluorescence In Situ Hybridization)
• con sonde alfoidi, painting, cosmidiche, BAC e PAC per la caratterizzazione dei riarrangiamenti cromosomici
• con sonde locus specifiche per i principali riarrangiamenti cromosomici ematologici
• con sonde cosmidiche locus specifiche per lo studio delle sindromi da microdelezione
• Array-CGH (Comparative Genomic Hybridization), per lo studio delle microdelezioni e delle microduplicazioni cromosomiche sia costituzionali sia acquisite
La patologia cromosomica
• Anomalie di numero
• meccanismi di formazione di aneuploidie e poliploidie
• diploidia uniparentale e imprinting genomico: mola vescicolare e teratocarcinoma
• principali sindromi autosomiche e gonosomiche
• disomia uniparentale e imprinting genomico

• Anomalie di struttura
• duplicazioni/delezioni, cromosomi ad anello, inversioni, isocromosomi, traslocazioni reciproche e robertsoniane
• meccanismi di formazione: dupliconi, ricombinazione omologa non allelica
• principali sindromi associate a duplicazioni/delezioni, isocromosomi, traslocazioni robertsoniane
• principali riarrangiamenti cromosomici ricorrenti nei tumori
• markers sovrannumerari
• la sindrome dell’X fragile
• cenni sulle sindromi da instabilità cromosomica
Citogenetica nel ciclo di vita
• indicazioni all'esame citogenetico
• diagnosi preimpianto
• diagnosi prenatale non invasiva
• villocentesi
• amniocentesi
• cordocentesi

Modalita’ di trasmissione ereditaria:
• Autosomica: dominante e recessiva
• Legata al cromosoma X: dominante e recessiva
• Mitocondriale
• Poligenica/multifattoriale
• disomia uniparentale e imprinting genomico

Mutazioni:
• Puntiformi: silenti, missenso, nonsenso, frameshift, di splicing
• Riarrangiamenti genici

Metodi di analisi degli acidi nucleici:

- Estrazione di DNA ed RNA

- Metodi per la ricerca di mutazioni note:
• Analisi di restrizione, ASO, Reverse Dot Blot, ARMS, OLA

Metodi per la ricerca di mutazioni sconosciute:
• DGGE, SSCP, DHPLC, HRMA
• Sequenziamento diretto del DNA
• Pirosequenziamento e sequenziamento di nuova generazione

Metodi per la ricerca di riarrangiamenti genici:
• Multiplex PCR
• PCR quantitativa
• MLPA

Analisi degli RNA
Oncogeni, geni oncosoppressori e mutatori: metodi di analisi delle alterazioni delle cellule somatiche

Classificazione dei Test Genetici